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哺乳动物长期致癌试验是目前公认的确认动物致癌物的经典方法，常选用大鼠和小鼠作为实验动物，期限大鼠为2年，小鼠为1.5年，常设3个剂量组和阴性对照组，高剂量组剂量应足够大，通常应为最大耐受剂量（MTD），观察主要指标是肿瘤发生的数量和性质。