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代谢物酶法测定可分为终点法和动力学法。代谢物浓度酶促终点法测定的基本条件是当待测物浓度[S]远小于其米氏常数Km时，任何时刻的反应速度v=V[s]/Km,呈一级反应动力学，即反应速度与测定物的浓度成正比，多被用来进行代谢物浓度测定。