分离培养是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病患者的唯一方法。所采集的标本应及时接种含有两种以上抗生素（万古霉素和多粘菌素等）的营养培养基（EPV）上。淋球菌对培养基的营养要求很高，且对冷、热、干燥和消毒剂抵抗力低，故采样后须立即接种干预温的选择性培养基和非选择性培养基中，如巧克力平板，置于含5%~10%的二氧化碳环境中，35℃培养48h。取小而透明似水滴状、无色素易乳化菌进一步鉴定。