《中国药典》(2010版)收载有苯巴比妥及其钠盐，利用芳环取代基的鉴别试验：①本品具有苯环，溶于甲醛后与硫酸反应，界面显玫瑰红色。②与硫酸垭硝基钠的反应。苯巴比妥可与硫酸-亚硝基钠反应，生成橙黄色产物，并随即变为橙红色。本反应的原理可能为苯环上的亚硝基化反应，确切的机理尚不明了。本法对其他巴比妥类药物不显色，因此，本试验可用于苯巴比妥与其他不含芳环取代基的巴比妥类药物的区别。《中国药典》(2010版)还收载有司可巴比妥鉴别方法：①取供试品1g，加水100ml溶解后，加稀醋酸5ml强力搅拌，再加水200ml，加热煮沸使溶解成澄清溶液（液面无油状物），放冷，静置，待析出结晶后，滤过，结晶在70℃干燥后测定，熔点约为97℃。②与碘试液的反应，司可巴比妥钠结构中含烯丙基，可与碘试液发生加成反应，使碘试液的棕黄色消失。《药典》还收载有硫喷妥钠鉴别方法：硫喷妥钠分子结构中含有硫元素，在氢氧化钠试液中可与铅离子反应，生成白色沉淀；加热后，沉淀转变为黑色硫化铅。