由于包被过程中固相载体表面不能被抗体或抗原蛋白完全覆盖，试验过程中加人的血清标本以及酶结合物中的蛋白也会部分地非特异性吸附于固相载体表面，最终导致非特异性显色而本底偏高。为避免该现象，需用1%~5%的牛血清蛋白或5%~20%小牛血清再包被1次，消除此干扰，此过程称为封闭。