对流免疫电泳时，在琼脂板上打两排孔，在负电极侧的各孔内加入待检抗原溶液，在正电极侧的各孔内加入诊断抗体溶液。在电场中，缓冲液为pH8.6，蛋白质抗原等电点较低（pl为4-5），在电场中带净负电荷数较多且分子量相对较小，在电场力作用下向正极泳动；而1gG由于等电点较高（pI为6-7）带净负电荷数较少且分子量大，电场力的作用小于电渗作用，使得抗体向负极移动，这样抗原和抗体在电场中相向移动，如果抗原与IgG对应，可在相遇的最适分子比例处形成沉淀线。