间接法既可检测未知抗原，也可检测未知抗体。检测未知抗原：先将针对抗原的特异诊断抗体（第一抗体，IgG）直接滴加于标本上，作用后洗涤，再加针对第一抗体的荧光抗抗体（第二抗体，抗人IgG-Ab）。检测未知抗体：将待测血清（第一抗体）加在已知抗原标本片上，作用后洗涤，再加针对第一抗体的荧光抗抗体。本法敏感性高于直接法，而且在不同抗原的检测中只需应用一种荧光抗体。