1.抗原
抗原是补体结合试验中的关键成分之一。它可以是各种病原体（如病毒、细菌等）的抗原成分，也可以是其他外源性的抗原。当抗原与相应的抗体结合后，能够启动补体结合反应。例如，在检测梅毒抗体时，梅毒螺旋体抗原参与反应，该抗原与待检血清中的梅毒抗体结合，从而引发后续的补体结合过程。
2.抗体
抗体是由浆细胞产生的免疫球蛋白，在补体结合试验中起着重要作用。抗体能够特异性地结合抗原，其类别可以是IgG、IgM等。例如，在检测某些病毒感染时，血清中的病毒特异性IgG或IgM抗体与病毒抗原结合。这种结合是高度特异性的，就像一把钥匙开一把锁，为补体结合创造条件。如果抗体不存在或者与抗原不匹配，补体结合试验就无法正常进行。
3.补体
补体是血清中的一组具有酶活性的糖蛋白，在补体结合试验中不可或缺。补体成分（如C1-C9等）参与整个反应过程。当抗原-抗体复合物形成后，补体能够与之结合。在试验过程中，补体的激活与否及激活程度可以反映抗原-抗体反应的情况。例如，通常会使用一定量的豚鼠血清作为补体来源，因为豚鼠血清中补体成分含量丰富且活性相对稳定。补体被激活后会产生一系列的级联反应，这些反应的结果是判断试验阳性或阴性的重要依据。
4.绵羊红细胞和溶血素
绵羊红细胞是补体结合试验中的指示系统成分。溶血素是针对绵羊红细胞的抗体。当补体没有被抗原-抗体复合物结合消耗时，补体就会与绵羊红细胞-溶血素复合物结合，导致绵羊红细胞溶血，这是补体结合试验的一种阴性结果表现。相反，如果抗原-抗体反应消耗了补体，没有足够的补体来引起绵羊红细胞溶血，这就表示补体结合试验阳性。所以，绵羊红细胞和溶血素在判断试验结果方面起到了指示作用。