单向琼脂扩散法是一种定量测定抗原的方法，常用来检测标本中各种免疫球蛋白及血清中各种补体成分的含量。其基本原理是在含有特异抗体的琼脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合，即形成白色沉淀环，其直径或面积与抗原浓度呈正相关，同时用标准抗原或国际参考蛋白制成标准曲线，用以定量检测未知标本的抗原浓度。
在单向琼脂扩散法测定免疫球蛋白时，每次测定都必须同时制作标准曲线，因为不同批次的抗体、琼脂、实验条件等因素都可能对结果产生影响，只有通过同时制作标准曲线，才能准确地根据沉淀环的大小计算出未知抗原的浓度。不能采用不同批号抗血清制作的标准曲线，除非经过严格的验证和校准；也不能仅以沉淀环大小报告结果，需要通过标准曲线进行定量分析；血清通常不需要灭活，但需保证血清的质量和新鲜度等。