酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用棋盘滴定法。棋盘滴定法是将抗原、抗体（或酶标记物）进行一系列稀释，然后交叉进行反应，通过比较不同组合的反应结果，找出能产生最强特异性信号且背景信号最低的抗原、抗体（或酶标记物）浓度，即最佳工作浓度。抗原稀释法、抗体稀释法或单纯的酶标记物稀释法都不能全面地确定最佳工作条件，而棋盘滴定法综合考虑了多种因素，能更准确地找到最佳工作浓度。