分离培养厌氧菌时，适合的培养标本是关键，标本在采集、运送和处理过程中要避免与空气接触，防止厌氧菌死亡或受到抑制，同时要尽快接种到合适的培养基中进行培养。而培养前未作直接涂片染色镜检、培养时间不足、标本在空气中放置过久、培养基未添加必要的补充物质等都可能导致厌氧菌培养失败。