皮内试验诊断Ⅰ型超敏反应时，通常在注射过敏原后20-30分钟观察结果。这是因为Ⅰ型超敏反应是速发型变态反应，在接触过敏原后数分钟至数十分钟内即可出现明显的皮肤反应，如红晕、风团等。若观察时间过短，可能反应尚未充分显现；若观察时间过长，可能会受到其他因素干扰，影响结果判断。所以答案为A。