温度会影响抗原抗体反应，进而影响免疫荧光染色效果，温度过高或过低都可能导致结合不稳定或反应速度改变，所以A选项是影响因素。pH会影响抗原、抗体以及荧光染料的电荷性质和结构，从而影响它们之间的结合和荧光信号，所以B选项是影响因素。荧光染料的浓度直接关系到荧光信号的强度，如果浓度过低可能导致信号弱难以检测，浓度过高可能出现非特异性染色等问题，所以C选项是影响因素。固定剂用于固定细胞形态和保持抗原的稳定性，合适的固定剂及固定条件对保证染色效果很重要，所以D选项是影响因素。增强剂在免疫荧光染色中一般不是常规影响因素，所以选E。