大环内酯类抗菌谱较窄，第一代药物主要对大多数G+菌、厌氧球菌、白喉棒状杆菌和包括奈瑟菌、嗜血杆菌在内的部分G一菌有强大抗菌活性，对嗜肺军团菌、弯曲菌、支原体、衣原体、弓形虫、非典型分枝杆菌等也具有良好作用。对产生β-内酰胺酶的葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有一定抗菌活性。第二代药物扩大了抗菌范围，增加和提高了对G菌的抗菌活性。大环内酯类药物的抗菌谱不包括大肠埃希菌、变形杆菌。