抗原抗体比例：
抗原抗体比例在合适范围是抗原抗体反应的重要条件。只有当抗原和抗体比例合适时，才能形成足够的抗原-抗体复合物，从而出现明显的反应现象，如沉淀、凝集等。如果抗原或抗体过量，会出现前带或后带现象，导致反应不明显或结果不准确。
反应介质：
一般采用8.5g/L盐水或其他缓冲液作为反应介质。合适的缓冲液可以维持反应体系的pH稳定，为抗原和抗体的结合提供良好的环境。因为抗原和抗体大多是蛋白质，其结构和活性在一定程度上受pH和离子强度的影响。
反应溶液pH：
反应溶液pH6-8是比较适宜的。在这个pH范围内，抗原和抗体的电荷状态相对稳定，有利于它们之间的静电相互作用和特异性结合。如果pH过高或过低，可能会导致抗原或抗体的变性，从而影响反应的正常进行。
抗体特性：
需要有高特异度、高亲合力的抗体。高特异度的抗体能够准确地识别和结合目标抗原，减少非特异性结合；高亲和力的抗体与抗原的结合更加牢固，有利于提高反应的灵敏度和准确性。
反应温度：
抗原抗体反应一般在室温（18-25℃）或37℃左右进行，而不是56℃。因为在56℃时，有些抗体会发生变性失活，而且这个温度不利于抗原和抗体之间的稳定结合，会影响反应的正常进行。