选项A：Km值是酶的特征性常数之一，不同的酶具有不同的Km值，可用于鉴别不同的酶，该选项正确。选项B：Km值只与酶的性质、底物种类和反应环境（如温度、pH等）有关，与酶的浓度无关，该选项错误。选项C：Km值越小，酶与底物的亲和力越大，反之，Km值越大，酶与底物的亲和力越小，该选项错误。选项D：同工酶是催化相同化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶，它们的Km值不同，该选项错误。选项E：Km值最小的底物是该酶的最适底物，该选项错误。